E.M.B. (EOSIN METHYLENE BLUE) LEVINE GÉLOSE

Fiche technique #1859 / 2010.07.15

La  gélose EMB de Levine, est un milieu solide utilisé pour la croissance et l'identification des bactéries  entéropathogènes Gram-négatif, provenant de spécimens cliniques, de l'eau, des produits laitiers et des aliments. Les indicateurs colorants éosine Y et bleu de méthylène, en plus d'inhiber certaines bactéries Gram positif, différencient celles fermentant le lactose (colonies  foncées) de celles ne le fermentant pas (colonies incolores). Une colonie foncée avec reflet vert métallique confirme la présence de Escherichia coli. Les entérocoques lorsqu'ils poussent, donnent des colonies en têtes d'épingles.

 

FORMULE

en grammes par litre d'eau purifiée filtrée 

Peptone de gélatine

10,0
Lactose

10,0
Phosphate dipotassium

2,0
Eosine Y

0,4
Bleu de Méthylène

0,065
Gélose

15,0

pH 7.4 +/- 0,2 à 25º C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour  des résultats optimaux.


PRÉCAUTIONS

Ce milieu est pour usage exclusif en laboratoire.

CONSERVATION

Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2-25˚ C. Garder le milieu préparé  à l'abri de la lumière, entre 2-8˚ C.

DÉTÉRIORATION

Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne  pas  utiliser  un milieu, dont la date de péremption est dépassée.

PRÉPARATONS

Verser 37,5 g de milieu déshydraté dans 1000 ml d'eau  purifiée  filtrée. Chauffer en agitant fréquemment et laisser bouillir  une minute. Stériliser à 121˚ C pendant 15 minutes. Refroidir à 45-50˚ C. Mélanger délicatement et distribuer dans des plats de Pétri stériles.

TECHNIQUE

Amener le milieu préparé à la  température de la pièce avant d'ensemencer.

1)     Ensemencer l'échantillon par épuisement pour obtenir des colonies isolées.

2)     Incuber à 35˚ C pendant 24-48 heures.


CONTRÔLE DE QUALITÉ 
Résultats après 24 hrs à 35ºC

Organismes

ATCC

Croissance

Couleur
Escherichia coli

25922

+

glauque métallique
Salmonella typhimurium

14028

+

incolore
Pseudomonas aeruginosa

27853

+

incolore
Enterobacter aerogenes

13048

+

brunâtre
Streptococcus faecalis

29212

+ ou partielle

 


LIMITES DE LA MÉTHODE
Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis


RÉFÉRENCES

  1. Lennette, E.H., Ballows, A., Hausler, W.J.Jr., and Shadomy, H.J. Manual of Clinical Microbiology. 4th ed. 1985 Washington D.C.: American society for Microbiology.
  2. Mac Faddin, Jean F., 1985 Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria. Vol.1. Baltimore, MD.: Williams & Wilkins.
  3. Standard Methods for Examination of Dairy Products 1985 15th ed. APHA Washington D.C.
  4. Standard Methods for Examination of Water and Wastewater 1985 15th ed. APHA Washington D.C.


NUMÉROS DU CATALOGUE

Milieu déshydraté 500 g QB-39-2506
     
Milieu préparé    
Pétri, 100x15 mm 10/pqt 1859