E.P.T. (ENTERIC PATHOGEN TRANSPORT)

Fiche technique #EPT / 2010.07.15

Le milieu EPT est un milieu semi-solide utilisé pour le prélèvement et le transport des spécimens de selles à la température ambiante surtout si elles renferment des micro-organismes exigeants et pathogènes comme les Campylobacter, les Yersinia, les Shigella  etc. Le pH augmenté, la quantité de gélose diminuée et l'ajout du rouge phénol comme indicateur colorant permettent une viabilité optimale de ces micro-organismes exigeants durant leur transport au laboratoire.

 

FORMULE
en gramme par litre d'eau purifiée filtrée

Thioglycolate de Sodium

1,5
Phosphate disodique

1,1
Phosphate dipotassique

0,2
Chlorure de Sodium

5,0
Chlorure de Calcium

0,09
Rouge Phénol

0,003
Gélose

1,6

pH 8,4 +/- 0,2 à 25º C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux.


PRÉCAUTIONS

Ce milieu est pour usage exclusif en laboratoire.

CONSERVATION

Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2-8º C. Garder le milieu préparé  à l'abri de la lumière, entre 2-25º C.

DÉTÉRIORATION

Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne  pas  utiliser  un milieu, dont la date de péremption est dépassée. 

PRÉPARATIONS

Verser 9,5 g de milieu déshydraté  dans 1000 ml d'eau  purifiée filtrée. Chauffer en agitant fréquemment et laisser bouillir  une minute. Stériliser à 121º C pendant 15 minutes. Refroidir à 45-50º C. Mélanger délicatement et distribuer dans des vials ou des contenants stériles.

TECHNIQUE

1)     Remplir le vial jusqu'à la ligne noire avec des selles   liquides    ou solides. Mélanger soigneusement et apporter au laboratoire.

2)     Ensemencer le mélange  directement et par épuisement  sur les milieux appropriés, sélectifs et non sélectifs.

3)    Incuber  aux  températures  et  au  nombre d'heures requises

Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.

CONTRÔLE DE QUALITÉ 
Résultats des sous cultures après 4 jours à la température de la pièce

Organismes

ATCC

Croissance
Escherichia coli

25922

+
Shigella flexneri

12022

+
Yersinia enterocolitica

9610

+
Salmonella typhimurium

14028

+
Campylobacter jejuni

33291

+

LIMITES DE LA MÉTHODE

Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.


RÉFÉRENCES

  1. Cary, S.G., M.H. Fusillo, C. Harkins 1965 Survival of Shigella and Salmonella in a new transport medium Am. J. Clin. Pathol 43:294
  2. Finegold, S.M., E.J. Baron 1986 Bailey and Scott's Diagnostic Microbiology 7th ed. C.V. Mosby St. Louis
  3. Lennette, E.H., Ballows, A., Hausler, W.J.Jr., and Shadomy, H.J. Manual of Clinical Microbiology. 4th ed. 1985 Washington D.C.: American society for Microbiology.
  4. Luechtefeld, M.W., W.L.L. Wang, M.J. Blaser, L.B. Reller 1981 Evaluation of transport and storage techniques for isolation of Campylobacter fetus subsp. jejuni from turkey cecal specimens J. Clin. Microbiol 13:438
  5. Mac Faddin, Jean F. 1985 Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria. Vol. I, Baltimore, MD.: Williams & Wilkins.


NUMÉROS DU CATALOGUE

Milieu déshydraté 500 g QB-39-1530
     
Milieu préparé    
Vials 15 ml 100/boîtes EPT-100
  25/boîtes EPT-25
Contenants 45 ml 100/boîtes EPT-100C