A 7 DIFFÉRENTIEL GÉLOSE

Fiche technique #1542 / 2010.07.08

La gélose A 7 est un milieu solide et sélectif utilisé pour la culture et l'isolement des Ureaplasma urealyticum et Mycoplasma sp. L'extrait de levure, le sérum de cheval et les différents enrichissements favorisent la croissance de l'Ureaplasma et des Mycoplasmas. La pénicilline inhibe les bactéries Gram positif. 

  

FORMULE

en grammes par litre d'eau purifiée filtrée

Peptone de caséine

13,6
Peptone de soya

2,4
Phosphate, dipotassique

2,0
Chlorure de Sodium

4,0
L-Cystéine, HCI

0,1
Dextrose

2,0
GHL, tripeptide

0,00002
Chlorure de Calcium

0,14
Putrescine HCl

1,66
Urée

1,0
Gélose purifiée

10,5
Suppléments

 
Sérum de cheval

200 ml
Extrait de levure fraîche pH 6,0

10 ml
Bio-X

5 ml
Antibiotique

 
Pénicilline

1,0 MM units

pH 6.0 +/- 0,2 à 25º C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux. 


PRÉCAUTIONS
Ce milieu est pour usage  diagnostique IN VITRO exclusivement. 


CONSERVATION
Entreposer à l'abri de la lumière, entre 2-8˚ C.

  
DÉTÉRIORATION

Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne pas utiliser un milieu dont la date de péremption est dépassée. 

 

 TECHNIQUE

 

Amener le milieu préparé à la température de la pièce avant d'ensemencer.

 

1) Les prélèvements uréthral,  vaginal, cervical, les   sédiments   urinaires   et   les   autres spécimens sont ensemencés dans le milieu de transport pour Mycoplasma  Ureaplasma Transport (2281).

2)  Transférer 0,1 ml de ce  milieu  de transport Mycoplasma-Ureaplasma dans un bouillon U9 (2361), 0,1 ml dans le bouillon Arginine (2991) et 0,1 ml sur une gélose A 7 (1542).

3)  Incuber les bouillons à 35˚ C en aérobiose.

4)  Incuber le milieu A 8 à 35˚ C sous atmosphère réduite en oxygène

5)  Examiner les bouillons et les  Pétris chaque jour jusqu'à un maximum de 7 jours.


CONTRÔLE DE QUALITÉ 
Résultats après 3 jours à 25ºC anaérobique

Organismes

ATCC

Croissance

Apparence
Ureaplasma urealyticum

27815

+

 colonies brunes
Ureaplasma urealyticum

27618

+

colonies brunes
Mycoplasma hominis

23114

+

 aspect d'oeufs frits


L'examen microscopique à faible grossissement (100x) montre des colonies brunes pour les Ureaplasmas alors que les Mycoplasmas ayant l'aspect  d'oeufs frits, sont caractérisées par l'absence de la membrane cellulaire et un noyau brunâtre. 

LIMITATIONS DE LA MÉTHODE

Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis. 


RÉFÉRENCES

  1. Balows, A., W.J. Hausler 1981 Diagnostic Procedures for Bacterial Mycotic and Parasitic Infections, 6th ed.
  2. Lennette, E.H., Ballows, A., Hausler, W.J.Jr., and Shadomy, H.J. Manual of Clinical Microbiology. 4th ed. 1985 Washington D.C.: American society for Microbiology, pp.407-411.
  3. Mac Faddin, Jean F., Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria Vol.1 1985 Baltimore, MD. Williams & Wilkins.
  4. Shepard, M.C., C.D. Lanceford 1976 Differential Agar Medium (A7) for identification of Ureaplasma urealyticum (human T-strain) in primary cultures of clinical material. J. Clin. Microbiol. 3:613-625.


NUMÉROS DU CATALOGUE

Milieu préparé

 

Pétri  60x15 mm      10/pqt                                 1542 

 

Aussi disponible en bouillon :

 

Transport Mycoplasma Ureaplasma

Tubes 12x75 mm    10/pqt                                  2281

 

Bouillon Ureaplasma U 9

Tubes 12x75 mm    10/pqt                                  2361

 

Bouillon Mycoplasma Arginine

Tubes 12x75 mm    10/pqt                                  2991