Support Fiches techniques N.Y.C. (NEW YORK CITY) MODIFIÉE GÉLOSE
Fiche technique #1276 / 2010.07.19
La gélose N.Y.C. modifiée est un milieu solide enrichi et sélectif, utilisé pour la croissance et l'isolement des bactéries exigeantes et pathogènes comme les Neisseria. Le sang de cheval hémolysé, le sérum de cheval, le dextrose et l'extrait de levure dialysée sont les éléments nutritifs permettant des croissances luxuriantes de ces microorganismes exigeants. La vancomycine, un inhibiteur des coccus gram positif, est remplacée par la lincomycine pour prévenir l'inhibition de certaines souches de Neisseria gonorrhoeae sensibles à cet antibiotique. Le triméthoprime lactate empêche l'envahissement du Proteus, alors que la colimycine inhibe les bacilles gram négatif et l'amphotéricine B est le fongicide.
FORMULE
en grammes par litre d'eau purifiée filtrée
Peptone de caséine ...........................................7,5
Peptone de tissus d'animaux .............................7,5
Amidon ..............................................................1,0
Phosphate de potassium, dibasique ..................4,0
Phosphate de potassium, mono–basique ..........1,0
Chlorure de sodium ............................................5,0
Gélose ..............................................................10,0
Enrichissements
Dextrose 50% .................................................10 ml
Extrait de levure dialysée ...............................25 ml
Sérum de cheval ..........................................120 ml
Sang de cheval hémolysé ..............................75 ml
Antibiotiques L.C.A.T......................................10 ml
pH 7,4 +/– 0,2 à 25º C
Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux.
PRÉCAUTIONS
Ce milieu est pour usage diagnostique IN VITRO exclusivement.
CONSERVATION
Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2–25º C. Garder le milieu préparé à l'abri de la lumière, entre 2–8º C.
DÉTÉRIORATION
Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne pas utiliser un milieu, dont la date de péremption est dépassée.
PRÉPARATIONS
Verser 36 g de milieu déshydraté dans 750 ml d'eau purifiée filtrée. Chauffer en agitant fréquemment et laisser bouillir une minute. Stériliser à 121º C pendant 15 minutes. Refroidir à 45–50º C. Ajouter le dextrose à 50% (8580), 25 ml d'extrait de levure dialysée (8643), 120 ml de sérum de cheval (4602), 75 ml de sang de cheval hémolysé (4177) et 10 ml de LCAT (8610). Mélanger délicatement et distribuer dans des plats de Pétri stériles.
TECHNIQUE
Amener le milieu préparé à la température de la pièce avant d'ensemencer.
1) Ensemencer l'échantillon directement et par épuisement.
2) Incuber à 35º C pendant 48 heures en atmosphère de CO2.
CONTRÔLE DE QUALITÉ
Résultats après 48 hrs à35ºC avec CO2
| Organisms |
ATCC |
Croissance |
| Neisseria gonorrheae |
43069 |
+ |
| Neisseria gonorrheae |
clinique |
+ |
| Neisseria meningitidis |
13090 |
+ |
| Proteus mirabilis |
43071 |
- ou patielle |
| Escherichia coli |
25922 |
- ou partielle |
| Neisseria sicca |
9913 |
- |
| Candida albicans |
60193 |
- ou partielle |
| Staphylococcus epidermidis |
12228 |
- ou partielle |
LIMITES DE LA MÉTHODE
Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.
RÉFÉRENCES
NUMÉROS DU CATALOGUE
| Milieu déshydraté | 500 g | QB-39-1906 |
| Milieu préparé | ||
| Pétri, 100x15 mm | 10/pqt | 1276 |
| Sang de cheval hémolysé | 100 ml | 4177 |
| Dextrose 50% | 100 ml | 8580 |
| Extrait de levure dialysée | 25 ml | 8643 |
| Sérum de cheval | 150 ml | 4602 |
| Supplément Bio–X, 10 ml | 10/pqt | 8601 |
| Supplément LCAT, 10 ml | 10/pkg | 8610 |
