PALCAM LISTERIA GÉLOSE

Fiche technique #1116 / 2010.07.20

La gélose Palcam pour Listeria est un milieu solide et sélectif utilisé pour l'isolement des Listeria monocytogenes dans les aliments et l’environnement. La présence de colonies noires démontre l'hydrolyse de l'esculine par les Listeria sp. Le chlorure de lithium, la polymyxine B, l’acriflavine HCl et la ceftazidime inhibent les autres bactéries.

 

FORMULE

en grammes par litre d'eau purifiée filtrée

 

Mélange spécial de peptones ..........................20,0

Extrait de levure .................................................2,5

Chlorure de sodium ............................................5,0

Mannitol............................................................10,0

Amidon ...............................................................1,0

Dextrose .............................................................0,5

Esculine..............................................................0,8

Citrate ferrique d'ammonium ..............................0,5

Chlorure de lithium ...........................................15,0

Rouge phénol ...................................................0,08

Gélose ..............................................................13,5

Inhibiteurs

Acriflavine HCl................................................0,005

Ceftazidime ......................................................0,02

Polymyxine B ................................100 000,0 unités

pH 7,2 +/- 0,2 à 25º C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux.

PRÉCAUTIONS

Ce milieu est pour usage exclusif en laboratoire.

CONSERVATION

Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2-25°C. Garder le milieu préparé à l'abri de la lumière, entre 2-8°C.


DÉTÉRIORATION

Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne  pas  utiliser  un milieu, dont la date de péremption est dépassée.

PRÉPARATIONS

Verser 69 g de milieu déshydraté  dans 1000 ml d'eau  purifiée filtrée. Chauffer en agitant fréquemment et laisser bouillir  une minute. Stériliser à 121°C pendant 15 minutes. Refroidir à45-50°C. Ajouter 2x5 ml de  supplément Palcam (#8726).  Mélanger délicatement et distribuer  dans des plats de Pétri.

TECHNIQUE

Amener le milieu préparé à la température de la pièce avant d'ensemencer.

Première méthode

1) Enrichir l’échantillon de l’aliment à tester dans un bouillon d’enrichissement LEB et l’incuber à 30°C pendant 48 heures. Faire la sous-culture sur la gélose Palcam et l’incuber à 35°C pendant 24-48 heures.

2) Transférer 0,1 ml du bouillon d’enrichissement LEB dans 9,9 ml  de bouillon Fraser. Incuber à  35°C pendant 24-48 heures. Faire la sous-culture sur une gélose Palcam et l’incuber à 35°C pendant encore 24-48 heures.

3) Noter toute colonie typique et  faire les tests de confirmation biochimiques et sérologiques requis.

Deuxième méthode

1) Enrichir l’échantillon de l’aliment à tester dans un bouillon   Fraser   demi  et  l’incuber à  30°C pendant 18-24 heures. Faire la sous-culture sur la gélose Palcam et l’incuber à 37°C pendant 48 heures.

2) Transférer 0,1 ml du bouillon Fraser demi dans 10 ml de bouillon  Fraser. Incuber à 37°C pendant  48 heures. Faire la sous-culture sur une gélose Palcam et l’incuber à 37°C pendant encore 24-48 heures.

3) Noter toute colonie typique et  faire les tests de confirmation biochimiques et sérologiques  requis.


CONTRÔLE DE QUALITÉ 
Résultats après 24 hrs à 35ºC 

Organismes

ATCC

Croissance
Listeria monocytogenes

15313

+ noires
Staphylococcus aureus

25923

- ou partielle
Escherichia coli

25922

- ou partielle

LIMITES DE LA MÉTHODE

Les colonies de Listeria apparaissent sur ce milieu de couleur gris-vert avec un précipité noir. Chaque colonie typique suspecte doit être confirmée par  des milieux de culture, des tests biochimiques et sérologiques appropriés. Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests  peuvent être requis.

RÉFÉRENCES

  1. Lennette, E.H., Ballows, A., Hausler, W.J.Jr., and Shadomy, H.J. Manual of Clinical Microbiology. 4th ed. 1985 Washington D.C.: American Society for Microbiology.
  2. Mac Faddin, Jean F. 1985 Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria. Vol. I, Baltimore, MD.: Williams & Wilkins.
  3. Van Netten, P., I. Perales, A. Van de Moosdijk, D.M. Curtis, D.A.A. Mossel 1989 Liquid and solid differentiation media for enumeration of L. monocytogenes and other Listeria spp. J. Food Microbiol. 8:299-316.


NUMÉROS DU CATALOGUE 

Milieu déshydraté 500 g QB-39-3509
     
Palcam Supplement, 10 x 5 ml 10/pqt 8726
     
Milieu préparé    
Pétri, 100x15 mm 10/pqt 1116