PRÉSENCE-ABSENCE (P-A) BOUILLON

Technical Data #39-3522 / 2005.08.31

Le bouillon Présence-Absence (P-A Broth) est un milieu liquide utilisé pour la recherche des coliformes dans les eaux potables. Un échantillon important et unique (100 ml) remplace la méthode usuelle des dilutions multiples et successives. Cette méthode, basée sur le principe établi qu’aucun coliforme ne doit être présent pour chaque 100 ml d’eau potable, met en évidence la présence ou l’absence des bactéries fermentant le lactose. Le bromocrésol pourpre est l’indicateur qui fait tourner le milieu au jaune lorsqu’il y a présence de bactéries fermentant le lactose, avec ou sans production de gaz.

FORMULE

en grammes par litre d'eau purifiée filtrée

Peptone de caséine .........................................9,83

Peptone de gélatine ...........................................5,0

Extrait de boeuf ..................................................3,0

Lactose.............................................................7,46

Phosphate dipotassique ...................................1,35

Phosphate monopotassique.............................1,35

Chlorure de sodium ..........................................2,46

Sulfate sodique de lauryl ..................................0,05

Bromocrésol pourpre....................................0,0085

pH 6,8 +/- 0,2 à 25˚ C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux.

PRÉCAUTIONS

Ce milieu est pour usage exclusif en laboratoire

CONSERVATION

Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2-25° C. Garder le milieu préparé à l'abri de la lumière, entre 2-8° C.

DÉTÉRIORATION

Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne pas utiliser un milieu, dont la date de péremption est dépassée.

PRÉPARATIONS

Pour une force de concentration triple, verser 91,5 g de milieu déshydraté dans 1000 ml d'eau purifiée filtrée. Chauffer légèrement pour dissoudre. Distribuer 50 ml dans des bouteilles de 250 ml pour la dilution du lait à bouchon vissé. Stériliser à 121° C pendant 15 minutes.

TECHNIQUE

Amener le milieu à la température ambiante avant d’ensemencer.

1) Ensemencer avec 100 ml d’eau à tester et inverser la bouteille plusieurs fois.

2) Incuber à 35° C pendant 24-48 heures.

3) Une réaction positive fait tourner au jaune la couleur pourpre du milieu.

4) Agiter doucement la bouteille et vérifier pour la production de gaz mise en évidence par la présence de mousse à la surface du milieu.

CONTRÔLE DE QUALITÉ
Résultats après 24 hrs à 35ºC

Organismes	ATCC	Croissance	Couleur	Gaz
Escherichia coli	25922	+	jaune	+/-
Escherichia coli	11775	+	jaune	+/-
Pseudomonas aeruginosa	27853	-	-	-

LIMITES DE LA MÉTHODE
Toute croissance après 48 heures ne peut être retenue comme un test présomptif positif pour les coliformes. Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.

RÉFÉRENCES

Atlas, R.M., 1997 Hanbook of Microbiological Media 2nd, ed. L.C. Parks editor CRC Press
Standard Methods for Examination of Water and Wastewater 1989 17th ed. APHA Washington D.C.

NUMÉRO DU CATALOGUE

Milieu déshydraté	500 g	QB-39-3522