B.B.E. (BACTEROÏDES BILE ESCULINE) GÉLOSE

Fiche technique #1557 / 2010.07.12

La gélose B.B.E. est un milieu sélectif solide utilisé pour la croissance et l'identification de Bacteroides fragilis. La bile de bœuf et la gentamycine inhibent la plupart des bactéries gram négatif. Le noircissement du milieu autour des colonies de Bacteroides confirme l'hydrolyse de l'esculine en présence de citrate ferrique ammoniacal.

 

FORMULE

en grammes par litre d'eau purifiée filtrée

Peptone de caséine

15,0
Bile de boeuf

20,0
Peptone de soya

5,0
Chlorure de Sodium

5,0
Esculine

1,0
Citrate ferrique d'ammonium

0,5
Gélose

15,0
Enrichissement

 
Hémine

0,01
Antibiotique

 
Gentamycine

0,1

pH 7,0 +/- 0,2 à 25º C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux.


PRÉCAUTIONS

Ce milieu est pour usage  diagnostique IN VITRO exclusivement

CONSERVATION

Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement  fermé, dans un endroit sec entre 2-25o˚ C. Garder le milieu préparé  à l'abri de la lumière, entre 2-8˚ C.


DÉTÉRIORATION

Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter  un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne  pas  utiliser  un milieu, dont la date de péremption est dépassée.


PROCÉDURES

Verser 40 g de milieu déshydraté  dans 1000 ml d'eau purifiée filtrée.  Ajouter 20 g de bile de bœuf, 1g d'esculine,  0,5g  de citrate  ferrique ammoniacal,  0,1 g d'hémine et 0,1 g de gentamycine. Chauffer en agitant  fréquemment et laisser bouillir une minute.  Stériliser à 121˚ C pendant 15 minutes. Refroidir à 45-50˚ C. Mélanger délicatement et distribuer  dans des plats de Pétri stériles.


TECHNIQUE

Amener le milieu préparé à la  température de la pièce avant d'ensemencer.

1)     Une croissance adéquate  des  anaérobies dépend du prélèvement et du  transport des spécimens. Pour  ce, il faut transférer les spécimens immédiatement, dans un milieu de transport  Pré-réduit  (2017) et  l'acheminer  au laboratoire, sans délai.

2)     Dès la réception, ensemencer le spécimen par épuisement.

3)     Incuber à 35˚ C en  atmosphère anaérobique pendant 48 heures.

4)     Examiner pour la croissance et le noircissement du milieu.


CONTRÔLE DE QUALITÉ 
Resultats après 48 hrs à 35ºC dans un atmosphère anaérobique.

 

Organismes

ATCC

Croissance

Hydrolyse
Bacteroides fragilis

25285

+

+
Bacteroides thetaiomicron

29741

+

+
Clostridium perfringens

13124

-

  
Staphylococcus aureus

25923

-

  
Escherichia coli

25922

-

  

 


LIMITES DE LA MÉTHODE

Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.


RÉFÉRENCES

  1. Dowell, V.R.Jr., G.l. Lombard, F.S. Thompson, A.Y. Armfield 1977 Media for isolation, characterization and identification of obligately anaerobic bacteria. CDC Laboratory Manual. Center for Disease Control, Atlanta
  2. Lennette, E.H., Ballows, A., Hausler, W.J.Jr., and Shadomy, H.J. Manual of Clinical Microbiology. 4th ed. 1985 Washington D.C.: American Society for Microbiology.
  3. Livingston, S.J., S.D. Kominos, R.B. Yee 1978 New medium for selection and presumptive identification of the Bacteroides fragilis group. J. Clin. Microbiol. 7:488-453.
  4. Sutter, V.L., D.M. Citron, M.A.C. Edelstein, S.M. Finegold Wadsworth Anaerobic Bacteriology Manual 4th ed C.V. Mosby St. Louis


NUMÉROS DU CATALOGUE

Milieu déshydraté 500 g QB-39-5106
Bile de boeuf 500 g QB-39-3518
Esculine 10 g QB-60-8250
Citrate ferrique d'ammonium 25 g QB-63-1725
Hémine 1 g QB-61-2110
Gentamycine 1 g QB-61-1913
     
Milieu prépaté    
Pétri, 100x15 mm 10/pkg 1557