B.C.Y.E. (A-BUFFERED CHARCOAL YEAST EXTRACT) GÉLOSE

Fiche technique #1251 / 2010.07.09

 La gélose B.C.Y.E. est un milieu solide utilisé pour la culture des Legionella sp. L'extrait de levure, la cystéine, le pyrophosphate ferrique augmentent la croissance, alors que le charbon activé neutralise l'effet toxique du péroxyde d'hydrogène. 

 

FORMULE

en grammes par litre d'eau purifiée filtrée

Extrait de levure

11,5
Charbon activé

1,5
Tampon ACES

6,0
alpha-Cétoglutarate

1,0
Gélose

17,0
Suppléments

 
Cystéine HCl

0,4
Pyrophosphate ferrique

0,25

5 pH 6,9 +/- 0,2 à 25º C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux. 


PRÉCAUTION

Ce milieu est pour usage  diagnostique IN VITRO exclusivement.

 
CONSERVATION

Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2–25º C. Garder le milieu préparé  à l'abri de la lumière, entre 2–8º C. 


DÉTÉRIORATION
Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne  pas  utiliser  un milieu, dont la date de péremption est dépassée. 


PRÉPARATION

Verser 37 g de milieu déshydraté dans 1000 ml d'eau purifiée filtrée. Chauffer en agitant fréquemment et laisser bouillir une minute. Ajuster le pH à 6,9 avec une solution de KOHIN. Stériliser à 121º C pendant 15 minutes. Refroidir à 45-50º C et aseptiquement, ajouter le supplément Legionnella (8708). Mélanger délicatement et distribuer en plats de Pétri.

 
CONTRÔLE DE QUALITÉ

Amener le milieu préparé à la  température de la pièce avant d'ensemencer.

1)   Ensemencer le spécimen aussitôt que possible par épuisement

2)   Incuber à 35º C en  atmosphère humide pendant 3 jours.

 

Organismes

ATCC

Croissance
Legionella pneumophila

33152

+
Legionella bozemanii

33217

+
Legionella dumoffii

33278

+

Les colonies de Legionella pneumophila apparaissent de couleur blanc–gris et donnent une fluorescence jaune–vert sous la lampe U.V.


LIMITE DE LA MÉTHODE

Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.

 RÉFÉRENCES

  1. Balows, A., W.J. Hausler Jr., K.L. Herrmann, H.D. Isenberg, J. Shadomy. 1991 Manual of Clinical Microbiology 5th ed. American Society for Microbiology. Washington, D.C.
  2. Buesching, W.J., R.A. Brust, L.W. Ayers. 1983 Enhanced Primary Isolation of Legionella pneumophila from Clinical specimens by Low-pH Treatment. J. Clin. Microbiol. 17:1153-1155.
  3. Edelstein, P., 1981 Improved Semisective Medium for Isolation of Legionella pneumophila from Contaminated Clinical and Environmental Specimens. J. Clin. MIcrobiol. 14:298-303.
  4. Feeley, J.C., G.W. Gorman, R.E. Weaver, D.C. Mackel, H.W. Smith. 1978 Primary Isolation Media for Legionnaires Disease Bacterium J. Clin. Microbiol. 8:320-325.
  5. Feeley, J.C., R.J. Gibson, G.W. Gorman, N.C. Langford, J.R. Rasheed, D.C. Mackel, W.B. Baine 1979 Charcoal-Yeast Extract Agar: Primary Isolation Medium for Legionella pneumophila. J. Clin. Microbiol. 10:437-441.
  6. Ristroph, J.D., K.W. Hedlund, S. Gowda. 1981 Chemically Defined Medium for Legionella pneumophila Growth. J. Clin. Microbiol. 13:115-119.


NUMÉROS DU CATALOGUE

Milieu déshydraté 500 g QB-39-2420
     
Milieu préparé    
Pétri, 100x15 mm 10/pqt 1251
Legionella Supplément, 5 ml 10/pqt 8708