Support Fiches techniques FRASER POUR LISTERIA
Fiche technique # 2591 / 2010.08.06
Le bouillon Fraser pour Listeria est un milieu liquide sélectif utilisé pour la recherche de Listeria monocytogènes L’esculine hydrolysée par les Listeria sp. forme un complexe foncé en présence de citrate ferrique ammoniacal. L’acide nalidixique inhibe les micro-organismes Gram négatif et l’acriflavine, les Gram positif. Le chlorure de lithium inhibe les entérocoques.
FORMULE
en grammes par litre d'eau purifiée filtrée
Peptone de caséine .........................................10,0
Extrait de viande de boeuf .................................5,0
Extrait de levure .................................................5,0
Chlorure de sodium ..........................................20,0
Chlorure de lithium .............................................3,0
Esculine..............................................................1,0
Phosphate disodique..........................................9,6
Phosphate monopotassique.............................1,35
Citrate ferrique ammoniacal .............................. 0,5
Acriflavine ......................................................0,012
Acide nalidixique ..............................................0,02
pH 7,3 +/- 0,2 à 25º C
Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux.
PRÉCAUTIONS
Ce milieu est pour usage exclusif en laboratoire.
CONSERVATION
Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2-25˚ C. Garder le milieu préparé à l'abri de la lumière, entre 2-8˚ C.
DÉTÉRIORATION
Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne pas utiliser un milieu, dont la date de péremption est dépassée.
PRÉPARATION
Verser 55,5 g de milieu déshydraté dans 1000 ml d'eau purifiée filtrée. Chauffer pour dissoudre et laisser bouillir pour une minute. Distribuer en tubes à culture. Stériliser à 121˚ C pendant 15 minutes. Un léger précipité se forme en refroidissant qui n’interfère pas à l’analyse.
TECHNIQUE
Amener le milieu préparé à la température ambiante avant d'ensemencer.
1) Ensemencer le spécimen directement
2) Incuber à 35˚ C pendant 24 heures
CONTRÔLE DE QUALITÉ
Résultats après 24 hrs à 35ºC
Organismes ATCC Croissance
Listeria monocytogenes 15313 +
Staphylococcus aureus 25923 - ou partielle
Escherichia coli 25922 - ou partielle
Enterococcus faecalis 29212 - ou partielle
LIMITES DE LA MÉTHODE
Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.
RÉFÉRENCES
1) Fraser, J.A. and Sherber, W.H. 1988 Rapid Detectiobn of Listeria in Food and Environmental Samples by Esculin Hydrolysis. J. Food Prot. 51:762-765
2) Mac Faddin, Jean F., 1985 Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria. Vol.1. Baltimore, MD.: Williams & Wilkins.
3) Standard Methods for Examination of Water and Wastewater 1989 17th ed. APHA Washington D.C.
NUMÉROS DE CATALOGUE
Milieu déshydraté 500 g QB-39-1804
Milieu préparé
Tubes 16x125 mm, 10 ml 10/pqt 2591
