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N.Y.C. (NEW YORK CITY) GÉLOSE

Fiche technique # 1865 / 2010.08.09

La gélose N.Y.C. est un milieu solide enrichi et sélectif, utilisé pour la croissance et l'isolement des bactéries exigeantes  et pathogènes comme les Neisseria. Le sang de cheval hémolysé, le sérum de cheval, le dextrose,  l'extrait de levure dialysée sont les éléments nutritifs permettant des croissances luxuriantes de ces micro-organismes exigeants. La vancomycine, un inhibiteur des coccus gram positif, est remplacée par la lincomycine pour prévenir l'inhibition de certaines souches de Neisseria gonorrhoeae sensibles à cet antibiotique.  Le triméthoprime lactate empêche l'envahissement du Proteus, alors que la colimycine inhibe les bacilles gram négatif et l'amphotéricine B est le fongicide.

 

FORMULE

en grammes par litre d'eau purifiée filtrée

 

Peptone de caséine ...........................................7,5

Peptone de tissus d'animaux .............................7,5

Amidon ............................................................1,0

Phosphate de potassium, dibasique ...................4,0

Phosphate de potassium, mono–basique ...........1,0

Chlorure de sodium ...........................................5,0

Gélose ..............................................................10,0

Enrichissements

Dextrose 50% .................................................10 ml

Extrait de levure dialysée ...............................25 ml

Sérum de cheval ............................................50 ml

Sang de cheval hémolysé ..............................20 ml

Antibiotiques C.L.A.T......................................10 ml

pH 7,4 +/– 0,2 à 25º C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour des résultats optimaux.

PRÉCAUTIONS

Ce milieu est pour usage  diagnostique IN VITRO exclusivement.

CONSERVATION

Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2–25º C. Garder le milieu préparé  à l'abri de la lumière, entre 2–8º C.

DÉTÉRIORATION

Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne  pas  utiliser  un milieu, dont la date de péremption est dépassée.

PRÉPARATION

Verser 36 g de milieu déshydraté  dans 750 ml d'eau  purifiée  filtrée.  Chauffer en agitant fréquemment et laisser bouillir  une minute. Stériliser à 121º C pendant 15 minutes. Refroidir à 45–50º C. Ajouter 10 ml de dextrose à 50% (8580), 25 ml d'extrait de levure dialysée (8643), 50 ml de sérum de cheval (4602), 20 ml de sang de cheval hémolysé (4177) et 10 ml de  CLAT (8689). Mélanger délicatement et distribuer dans des plats de Pétri stériles.

TECHNIQUE

Amener le milieu préparé à la  température de la pièce avant d'ensemencer.

1)     Ensemencer l'échantillon  directement et par épuisement.

2)     Incuber  à  35º  C  pendant  48  heures  en atmosphère de CO2.

CONTRÔLE DE QUALITÉ       

Résultats après 48 hrs à 35ºC avec CO2

Organismes                           ATCC                                 Croissance

Neisseria gonorrhoeae	43069	+
Neisseria gonorrhoeae	clinique	+
Neisseria meningitidis	13090	+
Neisseria sicca	9913	–
Staphylococcus epidermidis	12228	– ou partielle
Escherichia coli	25922	– ou partielle
Candida albicans	60193	– ou partielle
Proteus mirabilis	43071	– ou partielle

LIMITES DE LA MÉTHODE

Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.

RÉFÉRENCES

1)        Faur, Y.C., M.H. Weisburd, M.E. Wilson 1978 The selectivity of  vancomycin and lincomycin in NYC medium for the recovery of N. gonorrheae from clinical specimens. Health Lab. Sci. 15:22–27

2)        Granato, P.A., C. Schneible–Smith, L. B. Weiner 1981 Use of New York City Medium for improved recovery of Neisseria gonorrheae from clinical specimens 13:963–968

3)        Lennette, E.H., Ballows, A., Hausler, W.J.Jr., and Shadomy, H.J.  Manual of Clinical Microbiology. 4th ed. 1985 Washington D.C.:  American society for Microbiology.

NUMÉROS DE CATALOGUE

Milieu déshydraté                             500 g                QB–39–1906

Milieu préparé

Pétri 100x15 mm                             10/pqt               1865

Bi–plaque: Choco/NYC, 100x15 mm    10/pqt               1565

Jembec NYC, rectangulaire                 10/pqt               1410

Dextrose 50 %                               100 ml                8580

Extrait de levure dialysée                    25 ml                8643

Sérum de cheval                               50 ml                4173

Sang de cheval hémolysé                   25 ml                4501

Dextrose 50%                                 100 ml               8580

Antibiotiques CLAT, 10 ml                  10/pqt               8689