DNase VERT DE MÉTHYL GÉLOSE

Fiche technique #1876 / 2010.07.15

La  gélose DNase au vert de méthyl, est un milieu différentiel solide, utilisé pour détecter la production de la  désoxyribonucléase par le Stapylococcus aureus, les Serratia marcescens et les autres organismes  producteurs de DNase. Le vert de méthyl produit une zone incolore autour de la colonie productrice de désoxyribonucléase.

 

FORMULE

en grammes par litre d'eau purifiée filtrée 

Peptone de caséine

15,0
Peptone de soya

5,0
Acide Désoxyribonucléique

2,0
Chlorure de Sodium

5,0
Vert de méthyl

0,05
Gélose

15,0

pH 7.3 +/- 0,2 à 25º C

Cette formule approximative peut être ajustée et/ou enrichie pour  des résultats optimaux.


PRÉCAUTIONS

Ce milieu est pour usage exclusif en laboratoire.

CONSERVATION

Entreposer le milieu déshydraté dans un contenant hermétiquement fermé, dans un endroit sec entre 2-25˚ C. Garder le milieu préparé  à l'abri de la lumière, entre 2-8˚ C.

DÉTÉRIORATION

Ne pas utiliser un milieu déshydraté pris en masse ou croûté. Rejeter un milieu préparé présentant des signes de contamination ou de déshydratation. Ne  pas  utiliser  un milieu, dont la date de péremption est dépassée.

PRÉPARATIONS
Verser 42 g. de milieu déshydraté  dans 1000 ml d'eau  purifiée filtrée. Chauffer en agitant fréquemment et laisser bouillir  une minute. Stériliser à 121˚ C pour 15 minutes. Refroidir à 45-50˚ C. Mélanger délicatement et  distribuer dans des plats de Pétri stériles.


TECHNIQUE

Amener le milieu préparé à la  température de la pièce avant d'ensemencer.

1)     Ensemencer la gélose d'une ligne droite, à partir d'une dilution d'un bouillon de culture de 24 heures.

2)     Incuber à 35˚ C pendant 24 heures.


CONTRÔLE DE QUALITÉ 
Résultats après 24 hrs à 35ºC

Organismes

ATCC

Croissance

Zone claire
Staphylococcus aureus

25923

+

+
Escherichia coli

25922

+

-
Serratia marcescens

13880

+

+
Streptococcus pyogenes

19615

+

+
Klebsiella pneumoniae

33495

+

-


LIMITES DE LA MÉTHODE

Ce milieu permet une identification partielle. D'autres tests peuvent être requis.


RÉFÉRENCES

  1. Lennette, E.H., Ballows, A., Hausler, W.J.Jr., and Shadomy, H.J. Manual of Clinical Microbiology. 4th ed. 1985 Washington D.C.: American society for Microbiology.
  2. Mac Faddin, Jean F., Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria Vol.1 1985 Baltimore, MD. Williams & Wilkins.
  3. Finegold, S.M., and W.J. Martin., 1984 Bailey's and Scott's Diagnostic Microbiology. 6th ed. St. Louis. The C.V. Mosby Company.


NUMÉROS DU CATALOGUE

Milieu déshydraté 500 g QB-39-1117
     
Milieu préparé    
Pétri, 100x15 mm 10/pqt 1876